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肝素钠分析专用柱--南京旭析仪器
点击次数:3608 发布时间:2011-05-27

肝素钠分析专用柱--南京旭析仪器
肝素钠分析柱
 
柱子使用:

先不接柱子,将高效液相仪器(Aglient1200)系统完全替换成所用流动相,然后按照色谱柱上流动相流动方向安装柱子,开启液相流速,以流速0.5mL/min,用初始梯度流动相平衡柱子2.0 h,进样前将流速降到0.22 mL/min,至基线走平,进样;

再次进样之前需用0.5 mL/min的流速平衡柱子0.5 h,至基线走平。

如果用自动进样连续进样,可按照以下梯度平衡柱子进
柱子使用后处理:

高效液相色谱仪用去离子水冲洗干净后,用去离子水以0.5mL/min的流速冲洗柱子,至流出液以pH试纸测试呈中性(通常需冲洗两个小时以上),将柱子卸下,堵上堵头,放室温存放
容易出现的几种问题
一:基线不稳,重现性不好
解决:柱子未平衡好,充分平衡柱子
初次进样,平衡时间通常需要以0.5 mL/min平衡2 h。可进样前先走一针空白梯度,再回到初始梯度平衡,进样。若柱子尚未平衡好,出峰会出现异常的情况,如保留时间不重现,基线不稳,基线漂移不重现等。
下图为平衡正常的柱子和未平衡好的柱子走的图谱
二:基线漂移过高
解决:不同的高氯酸钠的导致流动相的差异
不同厂家生产的高氯酸钠可能由于纯度不同,导致基线的漂移差异很大,实验室使用过的国药、阿拉丁、上海凌峰的试剂,上海凌峰的试剂做出的图谱基线较平缓。
下图为相同条件下使用阿拉丁的和上海凌峰的高氯酸钠的出峰情况。
三:对照品进样出现鬼峰
解决:样品自身降解产生的杂质峰
系统适用性实验中发现,在对照品溶液中仍会有杂峰出现,保留时间为20 min,为对照品中肝素钠和多硫酸软 骨素降解产生的物质。
下图1为同一份肝素钠对照品溶液在不同保存环境下的出峰情况,图2为放置时间过久的多硫酸软骨素。

 

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